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1.PCR产物的酶切。
PCR产物的酶切与引物上引入的保护碱基有很大的关系,所以设计引物的时候就应该注意到这一点,如何选择保护碱基,具体参见NEB网站上关于保护碱基的资料:
PCR产物的酶切相关的帖子
2011年10月07日发布人:3N4G
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[size=2][color=Black][b]
养了有半年的3T3-L1,最近做诱导分化实验,可总是失败,到分化后第4天,细胞不少死亡,而且周围有大量黑点,还有脱壁情况发生.
这使我对细胞本身产生了怀疑,因为这细胞是别人送给我的
2012年02月18日发布人:loli
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][/size],[size=2]
产物加2倍体积的无水乙醇,0.1体积的乙酸钠,-20度放置1h,12000g,5’,依照你的酶切体系水溶DNA。[/size],[size=2]
你要如何酶切分析?两端的酶切位点切下来也无法判断。如果要鉴定内部
2015年12月04日发布人:铜雀
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[size=4][font=楷体_GB2312][求助]关于酶切
俺也想做酶切。但是说明书上给出的要求是DNA底物为1微克,这真是难为人,谁帮俺定定量呀?
还有说明书上给出的要求限制性内切酶用量为2-4单位,但试剂商提供的酶原
2011年10月07日发布人:mogu
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1000x Dex (1mM): MW=392.46, 1mM=0.39mg/ml in EtOH
1、3T3-L1前脂肪细胞诱导分化成脂肪细胞
3T3-L1小鼠成纤维细胞置于含10%FBS的高糖DMEM培养基中,37℃、5%CO2
2015年11月14日发布人:fklo83
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[size=4][color=Black][b]求助:PCR产物是否可以直接酶切呢 [转载]
我想对PCR产物分析一下,全部测序太贵了,不知道PCR产物是否可以直接酶切,需要注意些什么问题。谁有没有比较好PCR产物直接酶切的
2011年10月04日发布人:芙蓉宫主
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[size=2]这是我提取质粒后双酶切坚定地图谱,marker是10000的,最亮的那个条带是2000大小。双酶切的酶是HindIII和BssHII,切完之后应该出现的插入基因条带大小为1916bp,但是现在酶切出现了这么多条带是怎么回事
2014年10月28日发布人:purrr
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[size=2][color=Black][font=黑体]做了快俩月的酶切了,要崩溃了。泳道1是酶切前的GST融合蛋白,泳道2是酶切后的,只剩下GST了,我的目的蛋白哪里去了,应该在marker从下往上数第二和第三条带之间。不断的调整酶
2013年05月31日发布人:nvdabing
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[color=SlateGray][size=4][font=仿宋_GB2312]求助:pcr产物酶切后电泳不出条带 [转自 丁香园论坛]
我最近做PCR后酶切,出现两个问题求各位帮忙解决
1 PCR产物酶切后,电泳不出条带
2011年09月03日发布人:蛐蛐儿
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[size=2][b]从左到右分别是:质粒用Agel酶切,质粒用Agel酶切,marker,原始质粒。酶切体系50ul,质粒用6ug,37度水浴孵育2.5h, 为什么出现这种弥漫的条带?[/b][/size],[size=2]这是双酶切
2014年11月29日发布人:@STAR@